继20名中外学者之后Protein Cell该杂志发表的实验数据表明，韩春雨的论文（以下简称韩国论文）的实验结果不能重复NgAgo原始论文的Nature Biotechnology (天然生物技术，NBT）几天前，该杂志还发表了一篇同行评论文章（peer reviewed）无法检测到这个名字DNA介导的NgAgo基因编辑Failure to detect DNA-guided genome editing using Natronobacterium gregoryi Argonaute )作者来自三个在韩国、德国和美国有丰富基因编辑研究经验的研究小组。该杂志还发布了编辑部的关注，表达了对韩国论文可重复性的担忧，并表示将在2017年1月底前与原论文作者保持联系，完成调查。许多媒体已经对编辑部的关注做了很多报道，这里我将详细解释这个重复NgAgo学术论文基因编辑失败的实验设计和结果。
这三个研究小组独立进行了韩国论文的重复实验，合成了文章中使用的5‘磷酸化gDNA（guide DNA，可以介导韩国论文的描述NgAgo编辑到目标基因位点)，由韩国提供Addgene(质粒共享平台)NgAgo对于基因组，表达质粒感染了韩国论文中使用的细胞系DNA测试了编辑NgAgo它将发挥作用gDNA在介导下，定位在目标基因组位点并引起DNA双链断裂，导致目标位点出现小片段DNA插入或缺失突变（insertion and deletion，indel）。尽管多次尝试并试图优化条件，这三个研究组都无法检测到任何内源基因发生了NgAgo介导突变。
首先Cathomen研究小组试图重复韩国论文的中心Hela和293T细胞中利用NgAgo编辑质粒GFP(绿色荧光蛋白)基因，从而GFP表达实验。尽管使用了相同的实验系统和步骤，但使用了韩国论文gDNA（G3、G4），Cathomen研究小组没有检测到显著的GFP降低。
图为质粒表达GFP降低水平。可见使用CRISPR系统（Cas9）样品中有明显的GFP表达减少(约15倍)NgAgo使用韩国提供的组Addgene质粒（AgoN1）还是他们自己克隆的质粒（AgoN2），均未检测到GFP降低。
他们进一步尝试在基因组中编辑和整合GFP也没有发现基因GFP显著降低表达。
Ekker研究组在HEK293、Hela和K562在细胞中进行了检查NgAgo内源基因DYRK1A编辑使用了韩国论文中使用的五篇文章gDNA（G5、G6、G10、G12和G13）。目标基因突变尚未在所有样品中检测到。
I这五篇文章部分标注gDNA在目标基因上所处的位置。II部分是DNA每种颜色的峰值表示一个测序图DNA碱基(红色T，绿色A，蓝色C，黑色G）。可见无论用哪一个gDNA和NgAgo测序结果与普通未编辑细胞相同，意味着没有基因编辑被检测到( DNA序列没有改变)。
Kim研究小组针对韩国论文中的四个内源基因位点（DYRK1A，EMX1，GATA4，and GRIN2B）都进行了编辑实验，尝试了两种方法:脂质体转染和电穿孔转染NgAgo表达质粒和gDNA导入细胞。扩大不同样品中基因组的目标位点，并使用深度测序来确定突变频率。在所有的NgAgo高于测序误差的样品未检测到（0.1%）的目标位点DNA作为阳性对照，序列变化CRISPR样品（SpCas9，sgRNA）然后检测到高效的基因编辑。下图只显示了两个位点的数据。
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