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NgAgo到底能干什么?韩国科学家最新进展或推进真相?

NgAgo到底能干什么?韩国科学家最新进展或推进真相?

?韩国学者Jin-Soo Kim等在BioRxiv上传的文章说,DNA介导的NgAgo蛋白质切割是RNA,而不是DNA。

       摘要:

       许多科学家说韩春雨不能重复NgAgo剪切修饰DNA工作结束后,韩国科学家发了一封信,说他们也做不到NgAgo进一步的研究取得了新的进展。1月20日,他们以预印本的形式发表了一篇论文,称NgAgo可以作用于RNA。这个结果有什么意义?其他问题DNA科学家们也看到了编辑的作用NgAgo减少基因表达的作用,但当时只发现不是作用DNA,不知道是否有效RNA或者蛋白质。韩国科学家得到RNA是NgAgo作用靶。此外,还有其他科学家在寻找作用DNA的Ago其他家族同源蛋白。韩春雨的研究实际上刺激了新的研究。如何判断他的研究?诺维信拒绝解释的合作是什么意思?-生物技术收到了什么新材料,如何判断?事件还有待进一步发展。

       DNA介导的NgAgo基因组编辑到底能不能实现?去年5月,河北科技大学副教授韩春雨和合作伙伴率先进入自然-生物技术》(Nature Biotechnology)报告NgAgo-gDNA该系统可能是科学界关于基因编辑工具的巨大潜力NgAgo讨论基因组编辑是否真的可以进行还没有停止。

       1月20日,韩国学者报道了另一篇文章NgAgo研究。本文发布在本网站的论文预印上BioRxiv使用文章NgAgo进行依赖DNA的RNA切割”(DNA-dependent RNA cleavage by the Natronobacterium gregoryi Argonaute)称,DNA介导的NgAgo蛋白质切割是RNA,而不是DNA。

       NgAgo蛋白质切割是RNA,而不是DNA?

       文章显示,韩国国立首尔大学Jin-Soo Kim课题组通过体外生化实验发现NgAgo具有DNA依赖的RNA酶活性,他们也发现了它的和谐NgAgo结合的DNA(gODNs)序列必须与RNA反向互补,正义DNA(sense DNA)不能引导序列NgAgo切割靶RNA。也就是说,与NgAgo结合的DNA序列如果与RNA如果序列相同,则无法引导NgAgo切割靶RNA。

       相反,Jin-Soo Kim等人在体外生化系统中没有发现NgAgo有切割DNA这一结果与韩春雨之前发表的《自然》不同-生物技术NgAgo具有DNA酶活性的结论。

       去年8月8日,韩春雨正在向质粒共享信息库Addgene在详细的实验方法中提到EDTA(二价阳离子螯合剂)可能会受到影响NgAgo活动问题。在这篇论文中,Kim二价金属离子对体外生化提供了证据NgAgo的RNA酶活性(而非DNA酶活性)是必要的。

       作者还做了进一步的实验和测量gODNs长度与序列对NgAgo切割RNA影响效率。实验表明,gODNs核苷酸于13个核苷酸(nt)完全不能介导NgAgo的RNA酶活性,碱基错配会影响NgAgo酶活性,尤其是第一5-14nt(5’-3’方向)的碱基最为关键。这些结果与Cas9的DNA酶活性相似,但有趣的是,作者发现了它NgAgo可多次循环催化,而Cas9只能用一次。

       Kim等人在BioRxiv上传的论文在细胞内没有实验结果。

       几周前,Jin-Soo Kim在回复《知识分子》时,将文章提交给学术期刊进行评审。评审过程比预期的要长得多,Kim说。这是Kim第一次在bioRxiv报告他们的工作。24小时内,我们的文章在推特上被转发了50多次。Kim说。

       或者可以解释关于NgAgo的多个报道

       Kim等人的研究有什么意义?

       北京大学生命科学院研究员魏文生说,DNA介导的Argonaute切割RNA此前已报道研究,Jin-Soo Kim如果这项研究得到证实,这不是第一次DNA介导切割RNA的Argonaute。

       例如,2005年,洛克菲勒大学Tomas Tushcl实验室与Dinshaw J。Patel实验室证实,Ago家族的Aa-Ago具有DNA依赖的RNA可在内切酶活性55℃以DNA介导切割靶RNA。2016加州大学伯克利分校的年份Jennifer Doudna实验室发现,Mp-Ago在60℃也有以DNA介导靶向切割RNA的特性。

       “只是NgAgo因此,有必要确定它能做什么。魏文胜说。

       之前有多个实验室向《知识分子》表示,可以重复韩春雨论文中使用NgAgo以后GFP荧光衰减实验,但未发现基因编辑现象。

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